第二代试管婴儿：即卵细胞浆内单精子显微注射(intracytoplasmicsperminjection,ICSI)，是胚胎学家在倒置显微镜下用显微操作系统抓住一条形态学表现正常的精子，同时固定住一个成熟的卵母细胞，准确无误的将精子注射到卵细胞浆内，人为地完成精卵结合的过程。相对于第一代试管婴儿技术，ICSI操作跨越了精子运动，顶体酶释放，颗粒细胞消化，精卵结合，透明带反应等一系列步骤，特别是大大降低了对于完成受精过程所需的精子数量的要求（从百万的数量级降低到个位数），是目前男性不育患者最佳的助孕手段。
　　
　　目前，ICSI技术主要应用符合以上适应症的不育患者，但近年来有研究显示，严重少、弱精症是由染色体嵌合型异常引起，先天性双侧输精管缺如则常与囊性纤维膜传导基因突变有关，对这两种患者治疗前应告知遗传风险，妊娠后需进行详细产前诊断。或在胚胎移植前进行遗传学诊断（PGD），筛选遗传物质正常的胚胎移植。
　　
　　第二代试管婴儿适应症
　　
　　1、严重少、弱、畸形精子症患者
　　
　　2、不明原因不孕:第二代"试管婴儿"技术的受精率较常规"试管婴儿"高，对不明原因的不育患者，可建议进行ICSI技术助孕。
　　
　　3、前次"试管婴儿助孕"失败者:有证据表明，前次"试管婴儿"助孕失败的患者，再次采用"试管婴儿"助孕的受精率不会超过25%。而利用第二代"试管婴儿"技术助孕可获得较高的成功率。
　　
　　4、圆头(顶体缺乏)精子或完全不活动精子:第二代"试管婴儿"技术是唯一可以治疗的方法。
　　
　　5、阻塞性、非阻塞性无精症:通过附睾或睾丸手术获得数目较少或活动力很差的精子可用第二代"试管婴儿"技术助孕。
　　
　　6、取精困难或取卵后不能射精者:平时可收集精液冻存备用。若紧急情况无备用精，可取附睾或睾丸精子进行ICSI作为一种补救措施。
　　
　　7、种植前遗传学诊断:需诊断的胚胎，为避免透明带上粘附精子，对检验结果的影响，有必要采用第二代"试管婴儿"技术。
　　
　　北京好孕之家第二代试管婴儿
　　
　　自1992年比利时的Palermo医师在人类成功应用了ICSI技术，近30年来，生殖医学工作者一直致力于ICSI技术安全性的研究，也初步达到了业界共识，大多研究显示：
　　
　　第二代试管婴儿安全性
　　
　　1、同自然怀孕人群相比，ICSI技术出生子代严重出生缺陷概率并无显著增加；
　　
　　2、与自然怀孕子代相比，ICSI技术没有显著增加低出生体重儿、子代认知和行为发育障碍；
　　
　　3、与常规IVF相比，ICSI技术也未增加妊娠不良结局。
　　
　　因此，在现有的研究和数据的支持下，我们可以认为ICSI技术并不会对子代及亲代产生可预见的影响，是一项较为安全的医学助孕手段。但是，每个患者在辅助生殖治疗过程中，到底采用哪种助孕方法，还需要与自身因素相结合，选择适合自己的授精方式，达到最佳的治疗效果。